cAMPELISAkit-武汉百意欣

本试剂盒利用竞争酶联分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。包被羊抗鼠多抗体在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的标记辣根过氧化物酶的cAMP竞争性的结合抗cAMP单抗体，采用已知浓度的cAMP标准品来做标准曲线。检测450nm波长下的OD值，吸光度OD值与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线，通过测得的OD值可以计算出样品中cAMP的浓度，本试剂盒IC50（50%B/B0）约12pmol/mL，检测限约0.15pmol/mL。

cAMP可通过PKA使糖原合成酶磷酸化，导致具有活性的糖原合成酶a转变为无活性的糖原合成酶b，从而抑制糖原的合成。cAMP还能糖酵解中的一个关键酶——磷酸果糖激酶，催化6-磷酸果糖生成1，6-二磷酸果糖。另外，cAMPELISAkit，cAMP还能阻止ATP对磷酸果糖的抑制。此外，CAMP还可通过PKA脂肪蛋白激酶，使脂肪水解关键酶——敏感性甘油三酯脂肪酶磷酸化而，从而促进脂肪水解为甘油和游离脂肪酸。

本品为白色或类白色粉末；无臭，味微咸。本品在水中微溶，在乙醇或中几乎不溶。

用十八烷基键合硅胶为填充剂；以磷酸二氢钾溶液与四丁基化铵的混合溶液（取磷酸二氢钾6.8g与四丁基化铵3.2g，用水溶解并稀释至1000ml，摇匀，用磷酸调节pH值至4.3）－（85：15）为流动相；检测波长为258nm。取CAMP对照品约10mg，加水5ml使溶解，加1mol/L的盐酸溶液1ml，水浴加热30分钟后冷却，用试液调至中性，用水稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，CAMP峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求；理论板数按CAMP峰计算不低于2000，拖尾因子应小于1.4。

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